期刊简介

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  • 杂志名称:牡丹江医学院学报杂志
  • 主管单位:黑龙江省教育厅
  • 主办单位:牡丹江医学院
  • 国际刊号:1001-7550
  • 国内刊号:23-1270/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:期刊收录:知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中)
牡丹江医学院学报杂志2013年第04期

人Ism1表达载体的构建及其在293T细胞的表达

孙雪荣;邓韵婷;崔红晶;郑慧玲;薛传静;荆霞;刘新光

关键词:ism1, 表达载体, 基因重组, 293T细胞
摘要:目的:构建人Ism1基因真核表达载体,并验证其在真核细胞中的表达,为相关研究奠定基础.方法:采用高保真DNA聚合酶和GC缓冲液从A549细胞扩增获取人Ism1编码序列全长,经酶切、连接、转化后,挑取阳性克隆进行菌液PCR、双酶切,及测序鉴定;用构建成功的Ism1表达载体转染293T细胞,用实时定量RT-PCR检测Ism1表达水平.结果:构建的Ism1载体经菌液PCR,双酶切鉴定后,测序结果完全正确,载体转入293T细胞后,Ism1表达量显著上升.结论:成功构建能在真核细胞中表达的人Ism1基因载体,将为相关研究提供便利.